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普通西瓜為二倍體植物,即體內(nèi)有2組染色體(2N=22),用秋水仙素處理其幼苗,令二倍體西瓜植株細(xì)胞染色體成為4倍體(4N=44),這種4倍體西瓜能正常開花結(jié)果,種子能正常萌發(fā)成長。然后用4倍體西瓜植株做母本(開花時去雄)、二倍體西瓜植株做父本(取其花粉授4倍體雌蕊上)進(jìn)行雜交,從而得到三倍體種子。三倍體的種子發(fā)育成的三倍體植株,由于減數(shù)過程中,同源染色體的聯(lián)會紊亂,不能形成正常的配子。在開花時,其雌蕊要用正常二倍體西瓜的花粉授粉,以刺激其子房發(fā)育成果實。由于胚珠不能發(fā)育為種子,而果實則正常發(fā)育,所以這種西瓜無籽!
三倍體無籽西瓜含糖量高,品質(zhì)好,商品價值高,但由于制種過程復(fù)雜,種子萌發(fā)困難且不穩(wěn)定等因素,限制了其發(fā)展?,F(xiàn)在我國科研人員通過莖尖培養(yǎng)快速繁殖與嫁接技術(shù)相結(jié)合的方法,成功進(jìn)行了無籽西瓜的快速繁殖。
1、取材與培養(yǎng)無菌苗 取物資西瓜種子在70%究竟中浸5min,再用飽和漂上清液浸3h或用0.1%升汞消毒15min,用無菌水沖洗4-5次,在無菌條件下破殼取胚,接種于MS培養(yǎng)基中使其萌發(fā),章程無菌苗,培養(yǎng)基的蔗糖濃度為2%,瓊脂0.7%,PH6.4,培養(yǎng)室溫度20-25℃,利用自然光或燈光進(jìn)形培養(yǎng),光照強(qiáng)度3000lx ,光周期10h。
2、莖尖生長與分化 切取無籽西瓜無菌苗1cm長的頂芽,接種于附加KT,BA的MS培養(yǎng)基中,整燙濃度為3%,2-3周后頂芽周圍的腋芽增殖形成一個芽團(tuán)。分化芽的數(shù)量與培養(yǎng)基中附加的細(xì)胞分裂素的種類和濃度有關(guān),附加BA者分化芽數(shù)*多,其中當(dāng)BA濃度為0.25-0.5mg/L時,培養(yǎng)3-4周后,每個芽頂可形成5-10個芽叢,繼續(xù)提高BA濃度,雖可增加芽的數(shù)量,但叢芽不能伸長,難以利用;2ip和KT均可誘導(dǎo)形成叢生芽,但芽數(shù)量和質(zhì)量均不如BA誘導(dǎo)的叢芽。IAA和IBA與BA適當(dāng)?shù)呐浔扔欣谘康姆只?,MS培養(yǎng)基中附加0.25-0.5mg/L BA和1mg/L IAA時,芽的分化數(shù)量多,發(fā)育正常而穩(wěn)定。
芽叢可以再次分割進(jìn)行繼代培養(yǎng),以每3-4周形成5-15個芽的速度增殖。MS培養(yǎng)基上的芽在培養(yǎng)15d后開始變黃,而改用W培養(yǎng)基(降低氮素水平并改變硝態(tài)氮與銨態(tài)氮的比例,增加鐵鹽,其余成分MS培養(yǎng)基相同)則可以減緩補(bǔ)丁芽黃化速度,培養(yǎng)1個月后才開始變黃。另外,當(dāng)培養(yǎng)基偏酸(PH5.0-5.5)時,試管苗生長分化速度快但易于黃花,而近中性(PH6.4-7.0)時雖然芽的分化速度有所減慢,但可以較長時間保持綠色。
根據(jù)莖尖染色體檢查的記過,證明通過莖尖培養(yǎng)獲得的物資西瓜染色體數(shù)仍為33條,未發(fā)生染色體數(shù)量變異。
3、芽的伸長與嫁接 將芽叢轉(zhuǎn)入不含細(xì)胞分裂素的MS培養(yǎng)基中,芽基部形成不定根,莖葉開始伸長,約4周后,杰克剪取接穗,長度在2cm以上頂芽嫁接成活率可達(dá)96%,而長度低于1cm的接穗成活率26%。因此,在嫁接前將芽叢轉(zhuǎn)入MS培養(yǎng)基或MS+1mg/L GA3培養(yǎng)基促使不定芽伸長是保證嫁接成活率和嫁接苗質(zhì)量的必要環(huán)節(jié)。
嫁接砧木可選用雜種西瓜等常用砧木,砧木家借錢蹲苗1周左右可以使胚軸生長粗壯,鯉魚嫁接操作和愈合,嫁接1周后接口處才能愈合,這期間應(yīng)保持95%以上的相對濕度和20-30℃溫度,以提高成活率。
嫁接苗成活后20d,接穗長到10cm左右,具有5-8片較大葉片時,移至溫室外煉苗5d左右即可驚醒移栽,研究結(jié)果顯示,利用這種方式繁殖的無籽西瓜抗病性強(qiáng),根系吸收能力強(qiáng),產(chǎn)量明顯提高。
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