Illumina 平臺(tái)高通量測序 DNA 文庫定量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

Reference material of DNA library quantification for next generation sequencing

Illumina 平臺(tái)高通量測序 DNA 文庫定量系列標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為測量標(biāo)準(zhǔn)用于 illumina 高通量測序平臺(tái)的 DNA 文庫定量測量和實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制等領(lǐng)域。

一、樣品制備

      本系列標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是將大腸桿菌基因組 DNA 隨機(jī)打斷、構(gòu)建文庫后得到的平均長度主要為 355bp 的 DNA 片段，稀釋至一系列濃度后進(jìn)行分裝。

二、溯源性及定值方法

       該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用數(shù)字 PCR 方法對(duì)高通量測序 DNA 文庫定量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的目標(biāo)基因片段的拷貝數(shù)進(jìn)行測 定，作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值。本系列標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)通過使用滿足計(jì)量學(xué)特性要求的制備方法、測量方法和計(jì)量 器具，保證其量值溯源性。

三、特性量值及不確定度

 標(biāo)準(zhǔn)值不確定度評(píng)定考慮了定值方法、均勻性、穩(wěn)定性引入的不確定度分量。

四、均勻性檢驗(yàn)及穩(wěn)定性考察

        按照 JJF1343-2012《標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值的通用原則及統(tǒng)計(jì)學(xué)原理》要求，采用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 方法對(duì)該 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)研究，最小取樣量 5μL，結(jié)果表明均勻性良好。按照先密后疏的原則采用數(shù)字 PCR 方法對(duì)該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行穩(wěn)定性考察研究，標(biāo)準(zhǔn)值無方向性變化并通過平均值一致性檢驗(yàn)，表明穩(wěn)定性良好。

       本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)自定值日期起，有效期至 2021 年 4 月，研制單位將繼續(xù)跟蹤監(jiān)測該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性，有 效期內(nèi)如發(fā)現(xiàn)量值變化，將及時(shí)通知用戶。

五、包裝、儲(chǔ)存及使用

1.包裝與儲(chǔ)存：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用 1.5mL 立式擰口塑料離心管包裝，200μL/瓶。建議-70?C低溫長期保存。

2.使用注意事項(xiàng)：使用前應(yīng)先從冰箱內(nèi)取出，平衡至室溫后離心再打開瓶蓋使用。樣品開封后，應(yīng)盡快 恢復(fù)密封狀態(tài)。

3.使用建議：使用本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，每個(gè)濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)最小取樣量 5μL，然后再采用 熒光定量 PCR 進(jìn)行檢測。

聲明

1．本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)僅供實(shí)驗(yàn)室研究與分析測試工作使用。因用戶使用或儲(chǔ)存不當(dāng)所引起的投訴，不予承擔(dān)責(zé)任。

2．收到后請(qǐng)立即核對(duì)品種、數(shù)量和包裝，相關(guān)賠償只限于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)本身，不涉及其他任何損失。

3．僅對(duì)加蓋“中國計(jì)量科學(xué)研究院標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)專用章”的完整證書負(fù)責(zé)。請(qǐng)妥善保管此證書。

4．如需獲得更多與應(yīng)用有關(guān)的信息，請(qǐng)與技術(shù)咨詢部門聯(lián)系。 

注：以上信息僅供參考，以產(chǎn)品附帶證書為準(zhǔn)。