1、進(jìn)一步熟悉紫外分光光度計(jì)

2、學(xué)習(xí)在紫外光譜區(qū)測(cè)定酸奶中的納他霉素含量

二、實(shí)驗(yàn)原理

納他霉素在紫外光譜范圍內(nèi)在280nm處有肩，340 nm以上無明顯的吸收，由于納他霉素含有四烯環(huán)，因此在290、303、318 nm處有尖銳的吸收峰，其最大吸收波長(zhǎng)為303 nm，且該波長(zhǎng)附近吸收值穩(wěn)定范圍較寬，檢測(cè)器波長(zhǎng)即使有小的漂移也不會(huì)引起大的檢測(cè)誤差，因此，選擇303 nm作為納他霉素的檢測(cè)波長(zhǎng)既有足夠的靈敏度，又有可靠的穩(wěn)定性能，是理想的檢測(cè)波長(zhǎng)。而酸奶在303nm處干擾物質(zhì)較少，因而可用紫外分光光度法對(duì)酸奶中納他霉素進(jìn)行測(cè)定。

三、使用儀器、材料

1、儀器

紫外分光光度計(jì)、石英比色皿、分析天平、快速混勻器、25ml和50ml容量瓶、50ml三角瓶、離心機(jī)、500μl和1000μl移液槍

2、試劑

酸奶，甲醇，冰醋酸，95%納他霉素標(biāo)準(zhǔn)品，蒸餾水

四、實(shí)驗(yàn)步驟

1、配制納他霉素標(biāo)準(zhǔn)液

取10mg的95%納他霉素標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇：冰醋酸：蒸餾水=64：8：28溶液溶解，最后定容于100ml，備用；

分別取上述納他霉素貯備液500、750、1000、1250、1500、1750、2000μl于7只50ml容量瓶中，用甲醇：冰醋酸：蒸餾水=64：8：28溶液稀釋至刻度，搖勻；

2、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

以甲醇：冰醋酸：蒸餾水=64：8：28溶液為參比，在波長(zhǎng)303nm處測(cè)定步驟1配制的7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。

3、樣品測(cè)定

樣品溶液的制備：稱酸奶樣品2.5克（精確到0.001克），加甲醇16ml，加冰醋酸2ml，振蕩搖勻3-5分鐘，加水定容于25ml，離心后待用；

以未加納他霉素的酸奶為空白對(duì)照，處理方法同樣品溶液的制備。在波長(zhǎng)303nm處測(cè)定樣品的吸光度。

4、回收率和精確度實(shí)驗(yàn)

取處理好的酸奶樣品2份，1份作為本底值，另1份加入已知質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)液，分別按上面方法測(cè)定納他霉素含量，再根據(jù)測(cè)定值計(jì)算出納他霉素的回收率；

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）或變異系數(shù)（CV）：用不同儀器測(cè)定同一樣品，計(jì)算實(shí)驗(yàn)方法的重現(xiàn)性。

相關(guān)鏈接：納他霉素，甲醇，冰醋酸，蒸餾水，四烯環(huán)，容量瓶，北納生物

本文章來源于——《分析測(cè)試百科網(wǎng)》，如有版權(quán)問題，請(qǐng)與本網(wǎng)聯(lián)系