與食品直接接觸的塑料包裝材料，其安全性與消費(fèi)者健康密切相關(guān)，尤其是塑料中含有不同程度未聚合的有害單體或低聚物、添加劑、裂解物及老化產(chǎn)生的有害物，其中雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚聚氧乙烯醚、辛基酚聚氧乙烯醚作為良好的塑料助劑被廣泛添加到食品用塑料包裝、容器、工具等制品中，塑料制品反復(fù)使用或暴露于紫外、雨淋、高溫、高濕等環(huán)境中，可釋放雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚等烷基酚物質(zhì)，這些有機(jī)物通過(guò)接觸而遷移到食物中，對(duì)人體的內(nèi)分泌、生殖發(fā)育、免疫系統(tǒng)等造成危害。我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB 9685–2016 和歐盟指令（EU）No.10／2011 均明確規(guī)定了食品接觸材料中允許使用的添加劑品種、使用范圍、特定遷移限量或最大殘留量。

目前關(guān)于食品接觸材料中雙酚 A 遷移量研究報(bào)道較多，檢測(cè)方法主要為高效液相色譜（HPLC）法、氣相色譜（GC）法、液相色譜 –串聯(lián)質(zhì)譜（LC–MS／MS）法等。而關(guān)于烷基酚遷移量的研究未見(jiàn)報(bào)道。筆者參照 GB 31604.1–2015 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)　食品接觸材料及制品遷移試驗(yàn)通則》和 GB 5009.156–2016 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)　食品接觸材料及制品遷移試驗(yàn)預(yù)處理方法通則》，采用超高效液相色譜 – 串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC–MS／MS）法分析食品接觸材料中 4 種烷基酚物質(zhì)雙酚A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚向蒸餾水、3% 乙酸溶液、10% 乙醇溶液、20% 乙醇溶液、50% 乙醇溶液和異辛烷 6 種食品模擬物中的遷移特性，為食品接觸材料生產(chǎn)企業(yè)及檢測(cè)行業(yè)提供技術(shù)參考。

1　實(shí)驗(yàn)部分

1.1　主要儀器與試劑

高效液相色譜儀：Agilent 1260 型；

質(zhì)譜儀：Agilent 6495 型；

分析天平：CPA324S 型，感量為 0.1 mg；

超聲波清洗器：SB–100D 型；

旋渦混勻器：VORTEX4 型；

超純水系統(tǒng)：Milli-Q 型；

雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：純度均不小于 99%；

正己烷、甲醇、乙腈：色譜純；

氨水、乙醇、乙酸、異辛烷：分析純；

烷基酚物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：100.0 μg／mL，精密稱取各烷基酚物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品 10.0 mg（精確至 0.1mg），用色譜流動(dòng)相乙腈 –0.05% 氨水（體積比為7∶3）溶解并定容至 100 mL，于 4℃避光保存。

1.2　儀器工作條件

1.2.1　色譜條件

色譜柱：ZORBAX Eclipse XDB C 18 柱(50 mm×4.6 mm，1.8 µm) ；柱溫：35 ℃；進(jìn)樣體積：10 μL ；

流動(dòng)相：乙腈（含體積分?jǐn)?shù) 0.1% 的氨水），等度洗脫，流量為 0.3 mL／min。

1.2.2　質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧離子源，負(fù)離子模式（ESI–）；離子源溫度：150℃；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）；毛 細(xì) 管 電 壓：–3 000 V ；霧 化 器 壓 力：0.31 MPa ；干燥氣溫度：350 ℃；干燥氣流量：10L／min ；鞘氣溫度：300 ℃；鞘氣流量：11 L／min ；烷基酚類(lèi)物質(zhì)具體離子采集參數(shù)見(jiàn)表 1。

1.3　遷移試驗(yàn)

根據(jù)食品接觸材料及制品的預(yù)期使用用途和使用條件，參照 GB 31604.1–2015 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)　食品接觸材料及制品遷移試驗(yàn)通則》和 GB5009.156–2016 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)　食品接觸材料及制品遷移試驗(yàn)預(yù)處理方法通則》中制樣方法和試驗(yàn)方法，分別選擇蒸餾水、3% 乙酸溶液、10% 乙醇溶液、20% 乙醇溶液、50% 乙醇溶液和異辛烷 6 種食品模擬物，按照樣品表面積和食品模擬液體積比為 0.6 dm 2 ／(100 mL) 浸泡樣品，于 60℃靜止浸泡10 d，得到食品模擬物試液。

1.4　遷移后食品模擬物試液的處理

水基、酸性食品、酒精類(lèi)食品模擬物試液經(jīng) 0.22μm 濾膜過(guò)濾后供 UPLC–MS／MS 儀測(cè)定；準(zhǔn)確稱取油基食品模擬物試液 1 g 于離心管中，加入 3 mL正己烷，混勻，加入 2 mL 甲醇 – 水混合液 (1+1)，渦旋振蕩2 min，靜置分層，用注射器吸取下層水溶液，經(jīng) 0.22 μm 濾膜過(guò)濾后供 UPLC–MS／MS 儀測(cè)定。

2　結(jié)果與討論

2.1　質(zhì)譜條件的優(yōu)化

鑒于烷基酚物質(zhì)（雙酚A、四溴雙酚A、壬基酚、辛基酚）具有酚羥基的化學(xué)電離性質(zhì)，選用 ESI – 作為離子化模式，采用流動(dòng)注射泵連續(xù)進(jìn)樣方式分別將質(zhì)量濃度為 1.0 μg／mL 的烷基酚物質(zhì)注入離子源中進(jìn)行質(zhì)譜條件的優(yōu)化。結(jié)果表明，雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚在離子源 ESI – 電離方式下，均可獲得高豐度的［M–H］–離子峰；以該離子峰為母離子，采用子離子掃描方式進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析，經(jīng)優(yōu)化碎裂電壓、碰撞能量等質(zhì)譜參數(shù)，使準(zhǔn)分子離子與特征碎片離子產(chǎn)生的離子對(duì)質(zhì)譜強(qiáng)度達(dá)到最大。雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚的總離子流圖見(jiàn)圖 1。

2.2　色譜條件的選擇

烷基酚物質(zhì)雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚分子結(jié)構(gòu)中均含有酚羥基，通常呈弱酸性，易在離子源 ESI – 電離模式下形成［M–H］–母離子?？疾炝鲃?dòng)相中氨的濃度對(duì)色譜峰形、分離度及靈敏度的影響。結(jié)果表明，在流動(dòng)相中添加一定濃度的氨水，可以改變雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚在離子源中的離子化效率；隨著流動(dòng)相中氨水含量逐漸增大（體積分?jǐn)?shù)為 0.01%～0.1%），4 種烷基酚物質(zhì)的質(zhì)譜信號(hào)也隨之增強(qiáng)，當(dāng)氨水體積分?jǐn)?shù)為 0.1% 時(shí)，4 種烷基酚的離子化效率最高。因此選擇流動(dòng)相中添加體積分?jǐn)?shù)為 0.1% 的氨水溶液。

以乙腈（含體積分?jǐn)?shù)為 0.1% 的氨水）作為流動(dòng)相，比較不同品牌 C 18 色譜柱（Eclipse XDB C 18 ，Hypersil ODSC 18 ，Xbridge C 18 ，Xbridge C 8 ，BEHC 18 ）對(duì)雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚分離效果的影響。結(jié)果表明，采用 Eclipse XDB C 18 色譜柱作為分析柱時(shí)，4 種烷基酚類(lèi)物質(zhì)的質(zhì)譜響應(yīng)較強(qiáng)，各目標(biāo)物可有效分離，且峰形尖銳對(duì)稱。因此選擇Eclipse XDB C 18 色譜柱作為分析柱。

2.3　遷移條件的選擇

根據(jù) GB 31604.1–2015 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品接觸材料及制品遷移試驗(yàn)通則》對(duì)食品模擬物選擇的規(guī)定，模擬物應(yīng)能最大程度地模擬真實(shí)食品在可預(yù)見(jiàn)的使用條件下所表現(xiàn)的遷移特性，結(jié)合食品接觸材料預(yù)包裝的食品種類(lèi)，選擇蒸餾水、10%乙醇、3% 乙酸、20% 乙醇、50% 乙醇溶液和異辛烷 6種食品模擬物模擬水基、酸性食品、酒精類(lèi)食品、油基食品。

根據(jù) GB 5009.156–2016 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品接觸材料及制品遷移試驗(yàn)預(yù)處理方法通則》規(guī)定，遷移條件是產(chǎn)品可預(yù)見(jiàn)的最極端接觸條件，即遷移條件為最長(zhǎng)遷移時(shí)間和最高遷移溫度。目前食品接觸材料及制品的預(yù)期使用用途和使用條件一般為常溫及保質(zhì)期 18 個(gè)月，根據(jù)通則規(guī)定采用特定遷移升溫加速試驗(yàn)條件，按照樣品表面積和食品模擬液體積比為 0.6 dm 2 ／（100 mL）浸泡樣品，遷移溫度選擇 60℃，遷移時(shí)間選擇 10 d。

2.4　線性范圍和方法檢出限

分別選擇不含目標(biāo)物的食品模擬液為基質(zhì)，添加最終質(zhì)量濃度分別為 0.001，0.005，0.01，0.05，0.10，0.25，0.50 μg／mL 的烷基酚類(lèi)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照本實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定，以各目標(biāo)物的質(zhì)量濃度（x，μg／mL）為橫坐標(biāo)、質(zhì)譜響應(yīng)值（y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

分別以 3 倍和 10 倍信噪比所對(duì)應(yīng)的被測(cè)物含量作為方法檢出限和定量限。

4 種烷基酚類(lèi)有機(jī)物的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限列于表 2。由表 2 可知，在水基、酸性食品、酒精類(lèi)食品模擬物中，雙酚 A、四溴雙酚A、壬基酚、辛基酚在0.001～0.50 μg／mL濃度范圍內(nèi)，各目標(biāo)物的質(zhì)量濃度與其質(zhì)譜響應(yīng)值具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)不小于 0.999 5，檢出限為 0.01～0.25 μg／kg，定量限為 0.03～0.83 μg／kg ；在油基食品模擬物中，雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚的線性范圍為 0.01～0.50 μg／mL，線性相關(guān)系數(shù)不小于 0.998 9，檢出限為 0.10～2.50 μg／kg，定量限為 0.33～8.32 μg／kg。

2.5　加標(biāo)回收試驗(yàn)

選擇不含被測(cè)物的食品模擬物為基質(zhì)，添加不同濃度的烷基酚物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，分別配制成低、中、高濃度加標(biāo)樣品，按照本實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果列于表 3。由表 3 可知，雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚在食品模擬液中的加標(biāo)回收率為87.2%～101.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 1.5%～3.4%（n=6），表明該方法具有較高的準(zhǔn)確度和良好的精密度。

2.6　樣品分析

隨機(jī)選取市售 30 份食品接觸材料試樣（聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚丙烯、高密度聚乙烯、聚苯乙烯、聚碳酸樹(shù)脂、低密度聚乙烯，每種材質(zhì)各取 5份），按照本實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，30 份市售食品接觸材料樣品中，3 份檢出雙酚 A，含量為5.81～34.16 μg／kg ；1 份檢出四溴雙酚 A，含量為12.8 μg／kg ；4 份檢出壬基酚，含量為 23.1～61.24μg／kg ；1 份檢出辛基酚，含量為 32.4 μg／kg。表明目前市售食品接觸材料中可能殘留對(duì)人體健康存在潛在威脅的烷基酚物質(zhì)，為切實(shí)加強(qiáng)食品接觸材料產(chǎn)品質(zhì)量，應(yīng)強(qiáng)化產(chǎn)品檢驗(yàn)。

3　結(jié)語(yǔ)

采用蒸餾水、3% 乙酸溶液、10% 乙醇溶液、20%乙醇溶液、50% 乙醇溶液和異辛烷 6 種食品模擬物，建立了 UPLC–MS／MS 法測(cè)定食品接觸材料中雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚 4 種烷基酚物質(zhì)遷移量的分析方法。結(jié)果表明，在水基、酸性、酒精類(lèi)、油基食品模擬物中，雙酚 A、四溴雙酚 A、壬基酚、辛基酚的質(zhì)量濃度與其質(zhì)譜響應(yīng)值具有良好的線性關(guān)系，測(cè)定結(jié)果精密度、準(zhǔn)確度均較高。該法樣品前處理簡(jiǎn)單，可作為食品接觸材料中烷基酚類(lèi)化合物的檢測(cè)手段。