1. 從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化。2. 從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3. 離心, 1000rpm,5min;4. 棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5. 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞復蘇是與細胞凍存相反的過程,即是細胞恢復生長的過程,是將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細胞解凍之后重新培養(yǎng)。當恢復到常溫狀態(tài)時,細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)保持正常,生化反應即可恢復。與細胞凍存不同,細胞復蘇過程升溫要快,防止在解凍過程中水分進入細胞,形成冰晶,影響細胞存活。