1.常見基礎(chǔ)的培養(yǎng)基有BME、MEM、DMEM、RPMI 1640、DMEM/F12等?;A(chǔ)營(yíng)養(yǎng)成分包括氨基酸,是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)所必需的基礎(chǔ)成分;維生素,在細(xì)胞的代謝過程中發(fā)揮重要作用,支持細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能;葡萄糖,作為細(xì)胞的主要能量來源,滿足細(xì)胞在增殖過程中的能量需求;礦物質(zhì),包括鈉、鉀、鈣、鎂、磷和鐵等,這些礦物質(zhì)有助于維持細(xì)胞內(nèi)外的離子平衡和生理功能;緩沖系統(tǒng),MEM通常含有碳酸氫鹽,幫助維持培養(yǎng)基的pH值在適宜范圍(通常為7.2-7.4),以支持細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。
(1)BME(Basal Medium Eagle):基礎(chǔ)Eagle培養(yǎng)基,由平衡鹽溶液(BSS)+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素。在此基礎(chǔ)上改良的細(xì)胞培養(yǎng)基品種有MEM、DMEM、IMDM等。(2)MEM(Minimum Essential Medium):在BME的基礎(chǔ)上去除賴氨酸、生物素,增加氨基酸的濃度,適合多種細(xì)胞單層生長(zhǎng)最基本必需培養(yǎng)基是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適合多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞。
(3)DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) :是在BME 的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的,是原來各成分含量?jī)杀?。分高糖?含葡萄糖4500mg/L)和低糖型(含葡萄糖1000mg/L)兩種,高糖型適用于生長(zhǎng)較快,附著性較差的腫瘤細(xì)胞,但是又不希望他脫離原來生長(zhǎng)點(diǎn)的克隆培養(yǎng),所以常用于雜交瘤技術(shù)中骨髓瘤細(xì)胞和DNA 轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞。低糖型對(duì)于生長(zhǎng)速度較快、附著性差的腫瘤細(xì)胞有利。其營(yíng)養(yǎng)成分與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素增加了4倍,同時(shí)還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉氨基酸。(4)RPMI 1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基:最初為培養(yǎng)小鼠白血病細(xì)胞而制備。開始的配方特別適合懸浮細(xì)胞的生長(zhǎng),主要針對(duì)淋巴細(xì)胞。其組成較為簡(jiǎn)單,但是,正是因?yàn)槠浜?jiǎn)單,才可以適應(yīng)很多種類細(xì)胞的生長(zhǎng),適合多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞。特別是主要用于一些懸浮細(xì)胞培養(yǎng)以及人類白血病細(xì)胞的單層培養(yǎng)。其營(yíng)養(yǎng)成分包括含有還原劑谷胱甘肽、高濃度的維生素,生物素,維生素B12。
(5)DMEM/F12培養(yǎng)基:將DMEM與Ham's F12培養(yǎng)基以1:1比例混合改良而來的。改良得到的DMEM/F12培養(yǎng)基,營(yíng)養(yǎng)成分更為豐富,含有更多種微量元素,廣泛應(yīng)用于多種哺乳類細(xì)胞的培養(yǎng),也適用于低血清含量下哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。作為開發(fā)無血清配方的基礎(chǔ),以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營(yíng)養(yǎng)成分為優(yōu)點(diǎn)。已在DMEM/F12之中成功培養(yǎng)的細(xì)胞包括MDCK、膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、人內(nèi)皮細(xì)胞及小鼠成纖維細(xì)胞。