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1、流動(dòng)相 氣相色譜法的流動(dòng)相是氣體(又稱載氣),液相色譜法的流動(dòng)相為液相(又稱淋洗液)。
2、分類(按固定相不同) 氣相色譜法中,按固定相不同可分為:氣---固色譜法;氣---液色譜法。高效液相色譜法中,按固定相不同可分為:液---固色譜法;液---液色譜法。
3、固定相 氣固(液固)色譜的固定相:多孔性的固體吸附劑顆粒,如活性炭,活性氧化鋁,硅膠等。氣液(液液)色譜的固定相:化學(xué)惰性的固體微粒(擔(dān)體),固定液+擔(dān)體。
4、特點(diǎn) 氣相色譜法的特點(diǎn):高效能、選擇性好、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、應(yīng)用廣泛。 高效液相色譜法的特點(diǎn):高壓、高速、高效、高靈敏度。
5、應(yīng)用范圍 氣相色譜法的應(yīng)用范圍:對(duì)于難揮發(fā)和熱不穩(wěn)定的物質(zhì)是不適用的。高效液相色譜法的應(yīng)用范圍:從原則上說,高沸點(diǎn)難揮發(fā)且相對(duì)分子質(zhì)量大的有機(jī)物都適用。
6、分離機(jī)理
(1)氣相色譜法:氣相色譜是一種物理的分離方法。利用被測(cè)物質(zhì)各組分在不同兩相間分配系數(shù)(溶解度)的微小差異,當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),這些物質(zhì)在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配,使原來只有微小的性質(zhì)差異產(chǎn)生很大的效果,而使不同組分得到分離。
(2)液相色譜法:高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動(dòng)相改為高壓輸送;色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,同時(shí)柱后連有高靈敏度的檢測(cè)器,可對(duì)流出物進(jìn)行連續(xù)檢測(cè)。 概括為概括為概括為概括為::::氣固色譜的分離機(jī)理: 吸附與脫附的不斷重復(fù)過程; 氣液色譜的分離機(jī)理: 氣液(液液)兩相間的反復(fù)多次分配過程。液固色譜的分離機(jī)理:溶質(zhì)分子和溶劑分子對(duì)吸附劑活性表面的競(jìng)爭(zhēng)吸附。
7、儀器構(gòu)造
(1)氣相色譜法:由載氣系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜柱和檢測(cè)器的溫度均在控制狀態(tài)。
(2)液相色譜法:高效液相色譜儀主要由進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。
8、進(jìn)樣器 高效液相為平頭進(jìn)樣針,氣相色譜為尖頭進(jìn)樣針。
9、色譜柱長(zhǎng)
(1)氣相色譜柱通常幾米到幾十米。(氣相色譜由于載氣的相對(duì)分析量較低,分子間隙大,故粘度低,流動(dòng)性好,組分在氣相中流動(dòng)速度快,因此可以增加柱長(zhǎng),以提高柱效)。
(2)液相色譜柱通常為幾十到幾百毫米。
10、樣品柱前變化 氣相色譜的樣品在柱前必須變?yōu)闅怏w(氣化室汽化),而液相色譜的樣品在柱前則無變化。
11、所用檢測(cè)器 液相色譜法主要為:紫外檢測(cè)器,熒光檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器等; 氣相色譜主要為:氫火焰離子化檢測(cè)器(FID),熱導(dǎo)檢測(cè)器(TCD),電子捕獲檢測(cè)器(ECD),火焰光度檢測(cè)器(FPD),氮磷檢測(cè)器(NPD)等。
12、死時(shí)間 氣相色譜過程中,只要載氣流速穩(wěn)定就可以進(jìn)樣分析,而液相色譜過程中,通常需要平衡一段時(shí)間后再進(jìn)樣分析,特別是進(jìn)行梯度洗脫后柱子平衡時(shí)間較長(zhǎng)。
13、操作溫度 液相色譜通常在室溫下操作,較低的溫度,一般有利于色譜分離條件的選擇。而氣相色譜則不能,因?yàn)槭覝刈儎?dòng)幅度較大,使氣相色譜基線漂移嚴(yán)重而無法分析,所以必須精確控制溫度。
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