轉(zhuǎn)基因水稻 BT63（TT51-1）質(zhì)粒分子標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

Plasmid DNA Containing Genetically Modified BT63 (TT51-1) Rice DNA Fragments

       轉(zhuǎn)基因水稻 BT63 (TT51-1)質(zhì)粒分子標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制可用于轉(zhuǎn)基因水稻、食品和飼料等的定量檢 測、安全評價(jià)、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制、方法評價(jià)與驗(yàn)證、技術(shù)仲裁等。

一、樣品制備

       本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是將轉(zhuǎn)基因 BT63（TT51-1）水稻轉(zhuǎn)化體特異性序列和內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因片段共同構(gòu)建于 pEASY-T3 載體，得到 pNIM-003質(zhì)粒分子，經(jīng)提取，純化和質(zhì)量檢測及均勻性初檢合格后稀釋至 8.9×105 拷貝/μL 進(jìn)行分裝。

二、溯源性及定值方法

       該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用測序法、數(shù)字 PCR 方法分別對轉(zhuǎn)基因水稻 BT63（TT51-1）轉(zhuǎn)化體特異性基因片 段和水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因（RBE4）片斷的拷貝數(shù)比值進(jìn)行定值測量。測序法測量結(jié)果作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測序 比值標(biāo)準(zhǔn)值；數(shù)字 PCR 方法測量結(jié)果作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) PCR 比值標(biāo)準(zhǔn)值。本系列標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)通過使用滿足 計(jì)量學(xué)特性要求的制備方法、測量方法和計(jì)量器具，保證其量值溯源性。

三、特性量值及不確定度

       標(biāo)準(zhǔn)值不確定度評定考慮了定值方法、均勻性、穩(wěn)定性引入的不確定度分量。

四、均勻性和穩(wěn)定性考察

       按照 JJF1343-2012《標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值的通用原則及統(tǒng)計(jì)學(xué)原理》，采用采實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 方法對 該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)研究，最小取樣量 5μL，結(jié)果表明均勻性良好。按照先密后疏的原則采 用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 方法對該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行穩(wěn)定性考察研究，標(biāo)準(zhǔn)值無方向性變化并通過平均值一 致性檢驗(yàn)，表明穩(wěn)定性良好。

       本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)自定值日期起，有效期為 5 年，研制單位將繼續(xù)跟蹤監(jiān)測該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性，有 效期內(nèi)如發(fā)現(xiàn)量值變化，將及時(shí)通知用戶。

五、包裝、儲存及使用

1.包裝與儲存：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用 2mL 立式擰口塑料離心管包裝，500μL/瓶。建議-70?C 低溫長期 保存。

2.使用注意事項(xiàng)：使用前應(yīng)先從冰箱內(nèi)取出，平衡至室溫后再打開瓶蓋使用。樣品開封后，應(yīng) 盡快恢復(fù)密封狀態(tài)。

3.使用建議：使用本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，按照表 1 進(jìn)行梯度稀釋，然后再采用熒光定量 PCR 進(jìn)行檢測，引物和探針序列[1, 2]詳見表 2。

表 1 轉(zhuǎn)基因水稻 BT63 質(zhì)粒分子標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)梯度稀釋說明

 表 2 外源基因和內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因的引物及探針序列

聲明

1．本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)僅供實(shí)驗(yàn)室研究與分析測試工作使用。因用戶使用或儲存不當(dāng)所引起的投訴，不予承擔(dān)責(zé)任。

2．收到后請立即核對品種、數(shù)量和包裝，相關(guān)賠償只限于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)本身，不涉及其他任何損失。

3．僅對加蓋“中國計(jì)量科學(xué)研究院標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)專用章”的完整證書負(fù)責(zé)。請妥善保管此證書。

4．如需獲得更多與應(yīng)用有關(guān)的信息，請與技術(shù)咨詢部門聯(lián)系。 

注：以上信息僅供參考，以產(chǎn)品附帶證書為準(zhǔn)。