蚊蟲是重要的病媒之一，其體內(nèi)可攜帶多種致病微生物，嚴(yán)重危害人類健康。人們常采用驅(qū)避劑對其進(jìn)行防治。驅(qū)避劑通?？稍O(shè)計(jì)成直接施用于皮膚表面的劑型，在我國已注冊登記的昆蟲驅(qū)避劑劑型有驅(qū)蚊花露水、驅(qū)蚊液、驅(qū)蚊霜等。目前我國驅(qū)蚊護(hù)膚品的質(zhì)量良莠不齊，驅(qū)蚊護(hù)膚品中的有效成分未按規(guī)定劑量添加，以及不經(jīng)備案審批違規(guī)添加的情況時(shí)有發(fā)生，已成為廣大消費(fèi)者的安全隱患。近年來，國家質(zhì)檢總局和各地方質(zhì)量監(jiān)督部門多次報(bào)道驅(qū)蚊護(hù)膚品中潛在的質(zhì)量問題，對我國現(xiàn)有檢驗(yàn)檢測標(biāo)準(zhǔn)提出了更高的要求。

目前報(bào)道的昆蟲驅(qū)避劑分析方法主要有氣相色譜法、氣相色譜–串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜法、直接分析質(zhì)譜法等。上述方法大部分只局限于少數(shù)幾種驅(qū)避劑的分析，部分方法測定步驟復(fù)雜，不利于標(biāo)準(zhǔn)化工作的進(jìn)行，總之現(xiàn)有檢測方法不能有效覆蓋護(hù)膚品中所添加的昆蟲驅(qū)避劑的種類。筆者采用超聲波萃取法直接從樣品中提取常見的10種昆蟲驅(qū)避劑，減少了繁瑣的樣品前處理過程對目標(biāo)化合物造成的損失；以惰性較強(qiáng)的毛細(xì)管色譜柱分離待測組分，避免了采用極性色譜柱對儀器工作溫度造成的較大改變；用質(zhì)譜儀對目標(biāo)化合物進(jìn)行全掃描，完善了目標(biāo)化合物質(zhì)譜庫信息；采用選擇性離子掃描模式，降低了目標(biāo)化合物的檢出限，提高了抗干擾能力。所建方法拓展了氣相色譜–質(zhì)譜儀對昆蟲驅(qū)避劑的同時(shí)檢驗(yàn)?zāi)芰Α?/p>

1　實(shí)驗(yàn)部分

1.1　主要儀器與試劑

氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀：7890B–5977B型；

高速離心機(jī)：TGL–16M 型；

超聲波清洗機(jī)：SB25–12DT型；

電子分析天平：BSA224S 型，分度值為0.1mg；

N，N-二乙基間甲苯甲酰胺(避蚊胺)、N，N-二乙基苯乙酰胺(DEPA)、3，4-二氫 -2，2-二甲基-4-氧代–2H–吡喃-6-甲酸丁酯(避蚊酮)、丁基乙酰氨基丙酸乙酯(驅(qū)蚊酯)、1-乙?；?1，2，3，4-四氫喹啉、2-(2-羥乙基)-1-哌啶甲酸(1-甲基)丙基酯(羥派酯)、苯甲酸芐酯、吡啶酸雙丙酯(驅(qū)蠅定)、鄰苯二甲酸二丁酯(驅(qū)蚊叮)、N-(2-乙基己基)- 雙環(huán)(2，2，1)-5- 庚烯-2，3-二甲酰亞胺(增效胺)單組分標(biāo)準(zhǔn)品：純度均大于95.0%；

丙酮：色譜純；

氯化鈉：分析純；

高純氦氣：純度不低于 99.999%。

1.2　儀器工作條件

1.2.1 色譜儀

毛細(xì)管色譜柱：HP–5MS UI 柱(30 m×0.25mm，0.25μm)進(jìn)樣口溫度：290℃；進(jìn)樣口壓力91.7kPa ；隔墊吹掃流量：3mL／min ；柱升溫程序：起始溫度60℃，以20℃／min升至150℃，保持8min，再以25℃升至300℃；載氣：高純氦氣，流量為1mL／min ；分流模式：不分流；進(jìn)樣體積：1μL ；色譜–質(zhì)譜接口溫度：300℃。

1.2.2 質(zhì)譜儀

離子源溫度：280℃；四極桿溫度：150℃；EM電壓：889V ；溶劑延遲時(shí)間：4min ；掃描模式：全掃描與選擇離子同時(shí)掃描；電離方式：電子轟擊電離(EI)。

1.3　樣品前處理方法

1.3.1 水劑型樣品

稱取代表性樣品0.5g，精確至0.1mg，置于10mL具塞比色管中，加入8mL丙酮，在超聲波清洗器中超聲振蕩30min，靜置至室溫，用丙酮稀釋至標(biāo)線，適當(dāng)渦旋混勻，得到提取液。

1.3.2 乳液、膏霜型樣品

樣品經(jīng)1.3.1超聲渦旋提取后，加入 1 g 氯化鈉，渦旋震蕩，取部分溶液置于離心管中，以8000r／min離心8min，取分離清液為提取液。移取2 mL提取液，用有機(jī)相針式過濾頭過濾，濾液供測定用，外標(biāo)法定量。當(dāng)樣品中驅(qū)避劑含量較高，超出標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度范圍時(shí)，濾液應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)稀釋。

1.4　標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：2500 mg／L，分別稱取單組分標(biāo)準(zhǔn)品各250mg，用丙酮溶解并定容至100mL，振蕩搖勻。

混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別精密移取混合標(biāo)準(zhǔn)品儲備液10，20，40，80，160，320，640μL于7只25mL容量瓶中，用丙酮定容至標(biāo)線，配制成質(zhì)量濃度均分別為 1.0，2.0，4.0，8.0，16.0，32.0，64.0mg／L的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

2　結(jié)果與討論

2.1　色譜條件的選擇

考察了不同極性色譜柱的適用性，結(jié)果顯示，強(qiáng)極性氣相色譜柱DB-wax，HP–FFAP等其工作溫度不能覆蓋高沸點(diǎn)化合物接近 300℃的出峰溫度；中等極性的色譜柱如DB–1701 與非極性色譜柱如HP–5MSUI均可實(shí)現(xiàn)化合物的完全分離。鑒于氣相色譜–質(zhì)譜聯(lián)用儀日常分析化合物種類繁多，無法頻繁放空以更換色譜柱，對色譜柱工作溫度范圍有寬泛的需求，最終選擇工作溫度覆蓋范圍較廣的低流失非極性毛細(xì)管柱，即 HP–5MSUI柱 (30 m×0.250 mm，0.25μm)。在 1.2 儀器工作條件下，對 1.4 中的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行測試，結(jié)果表明，目標(biāo)化合物可以實(shí)現(xiàn)充分分離，互不干擾，圖1為4mg／L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的特征離子流圖。

2.2　質(zhì)譜條件的選擇

對10種昆蟲驅(qū)避劑標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行質(zhì)荷比(m／z30～300）掃描檢測，全掃描(SCAN)與選擇離子(SIM) 模式同時(shí)采集數(shù)據(jù)。通過全掃描采集的數(shù)據(jù)獲得10種昆蟲驅(qū)避劑質(zhì)譜圖，以實(shí)現(xiàn)定性分析。根據(jù)全掃描的離子采集結(jié)果，選擇豐度最大的離子作為定量離子，同時(shí)選擇豐度相對較大的3個(gè)離子作為輔助定性離子(見表1)。以選擇離子模式采集的數(shù)據(jù)作為定量依據(jù)，有利于基質(zhì)干擾峰的排除，基線更加平穩(wěn)。圖2為目標(biāo)化合物的代表性質(zhì)譜圖。

2.3　樣品前處理方法選擇

有機(jī)物的提取方法有超聲波提取法、索氏萃取法、微波提取法和加速溶劑提取法等。索氏萃取法耗時(shí)較長，微波提取法與加速溶劑提取法會(huì)產(chǎn)生較高的溫度，造成目標(biāo)物質(zhì)的損失；其它樣品前處理方法較復(fù)雜且易造成回收率與精密度不穩(wěn)定。本實(shí)驗(yàn)選擇超聲波提取并配合渦旋操作的樣品前處理方法，該方法能夠充分提取目標(biāo)化合物，減少試液配制過程中的損失。

2.4　提取溶劑的選擇

以避蚊胺為目標(biāo)化合物，選取9個(gè)代表性樣品進(jìn)行加標(biāo)制樣，加標(biāo)量為 100 mg／kg，考察不同萃取溶劑（丙酮、甲醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷）對目標(biāo)物萃取率的影響，試驗(yàn)結(jié)果見表2。由表2可知，丙酮對驅(qū)蚊護(hù)膚品中驅(qū)避劑的提取效率略優(yōu)于其它溶劑；二氯甲烷和正己烷在不同樣品的測試中，回收率產(chǎn)生較大的波動(dòng)，平均回收率較低，其中二氯甲烷因其黏度較小，易揮發(fā)等原因，移取時(shí)容易滴漏。實(shí)驗(yàn)最終選擇丙酮作為超聲波萃取溶劑。

2.5　標(biāo)準(zhǔn)工作曲線與方法檢出限

在1.2儀器工作條件下，對1.4中混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行測定，以定量離子的響應(yīng)值(Y)為縱坐標(biāo)、待測組分的質(zhì)量濃度(X)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。當(dāng)信噪比S／N=3時(shí)，計(jì)算各組分的檢出限；當(dāng)信噪比S／N=10時(shí)，計(jì)算定量限。各目標(biāo)化合物的線性范圍、回歸方程、相關(guān)系數(shù)，檢出限及定量限見表3。

由表3可知，10種昆蟲驅(qū)避劑在考察范圍內(nèi)線性良好，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.999。各組分的檢出限在0.2~5.6mg／kg范圍內(nèi)，定量限在0.7~18.5mg／kg范圍內(nèi)。

2.6　加標(biāo)回收及精密度試驗(yàn)

選擇不含目標(biāo)化合物的護(hù)膚品樣品作為基質(zhì)，添加10種昆蟲驅(qū)避劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的加標(biāo)量以處理試液濃度不超出標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度范圍為原則，按低、中、高濃度進(jìn)行考察。每個(gè)試液平行測定6次，計(jì)算回收率及測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見表4。由表4可知，方法的加標(biāo)回收率為88.8%～96.2%，測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.5%～4.9%(n=6)，小于5%，可見方法具有良好的精密度和準(zhǔn)確度，滿足護(hù)膚品中添加劑分析測試要求。

3　結(jié)語

采用氣相色譜–串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)快速檢測驅(qū)蚊護(hù)膚品中昆蟲驅(qū)避劑含量，該方法對于基體復(fù)雜的樣品具有較強(qiáng)的抗干擾能力，避免樣品檢測出現(xiàn)假陽性，對目標(biāo)化合物檢測靈敏度較高，可為驅(qū)蚊護(hù)膚品的安全監(jiān)督提供重要技術(shù)支持。