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?LC-MS/MS應(yīng)用原理

小雪-會(huì)員頭像-m.kingble.com北納生物
小雪 2021-09-03 23:26 評(píng)論( 0 ) 瀏覽( 760 )

LC-MS/MS在液相質(zhì)譜的基礎(chǔ)上采用串聯(lián)質(zhì)譜，能夠獲得分子離子峰和碎片離子峰，可對(duì)堿基同時(shí)進(jìn)行定性和定量分析。第一步使用TRIzol提取完Total RNA后，對(duì)mRNA進(jìn)行富集并去除rRNA。第二步是在37℃條件下，將200-300 ng mRNA用含有25 mM NaCl和2.5 mM ZnCl2緩沖液的核酸酶P1（2 U）消化2 h，然后加入NH4HCO3（1 M，3 μl）和堿性磷酸酶（0.5 U），37℃再孵育2 h后，將RNA從單鏈消化成單個(gè)堿基。

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