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抗體的蛋白質(zhì)檢測存在一些缺點,抗體的可用性和質(zhì)量差別很大。通過分析人類蛋白靶標(biāo)有關(guān)的抗體的系統(tǒng)生發(fā)和特征,來尋找解決這些問題的方法。一種稱為三重四極桿質(zhì)譜儀(triple quadrupole)技術(shù)的質(zhì)譜方法能檢測到獨(dú)一無二的特異性肽段,幫助研究人員高靈敏度,可重復(fù)性的定量監(jiān)測這些蛋白。定向蛋白質(zhì)組的核心是利用串聯(lián)四級桿質(zhì)譜特有的MRM掃描方式來定向檢測蛋白質(zhì),通過軟件計算要檢測蛋白質(zhì)的肽對應(yīng)的母子離子對,用串聯(lián)四級桿質(zhì)譜進(jìn)行MRM掃描,得到MRM色譜峰,一般還會進(jìn)行MSMS掃描,以對這些肽的MRM進(jìn)行序列確認(rèn),或利用 MSMS進(jìn)行定性和翻譯后修飾位點檢測等。PRM靶向蛋白質(zhì)組,是一種基于高分辨、高精度質(zhì)譜的靶向定量技術(shù),其基本原理是:四級桿(Q)首先選出的目標(biāo)肽段離子,進(jìn)入碰撞室中打碎后,所有的碎片離子經(jīng)過質(zhì)量分析器產(chǎn)生一張高分辨的二級質(zhì)譜圖,通過提取其中的碎片離子信息即可實現(xiàn)目標(biāo)肽段的定量。能夠?qū)δ繕?biāo)蛋白質(zhì)/肽段(以及含有修飾的肽段)進(jìn)行選擇性檢測,靶向蛋白質(zhì)組掃描就像精準(zhǔn)狙擊,排除干擾,目標(biāo)明確,每一槍直指目標(biāo)。從而實現(xiàn)對目標(biāo)蛋白質(zhì)/肽段的精準(zhǔn)定量。靶向蛋白質(zhì)組掃描就像精準(zhǔn)狙擊,排除干擾,目標(biāo)明確,每一槍直指目標(biāo)。
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