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葉綠素含量的測(cè)定方法主要有紫外分光光度法、熒光分析法、活體葉綠素儀法、光聲光譜法和高效液相色譜法。不過目前應(yīng)用最為廣泛的還是分光光度法。
葉綠素提取液的吸收光譜表明：有兩個(gè)強(qiáng)吸收峰，分別在紅光區(qū)和藍(lán)紫區(qū)，不同提取溶劑和原料所得的葉綠素溶液的吸收光譜比較相似。葉綠素a、葉綠素b的紅區(qū)最大吸收峰分別在663nm、645nm附近，在藍(lán)紫區(qū)分別為429nm、453nm附近。由于提取溶劑和原料不同，對(duì)葉綠素提取液進(jìn)行光譜掃描后，所得的最大吸收值可能有較小范圍的浮動(dòng)。
高效液相色譜(HPLC)定量檢測(cè)葉綠素含量準(zhǔn)確率較高，效果很好。用甲醇和丙酮作為流動(dòng)相，體積比為80：20時(shí)，同時(shí)在流動(dòng)相中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的冰醋酸，流速為1.0mL/min。利用每一種色素的色譜峰面積進(jìn)行定量，葉綠素a、葉綠素b的定量可通過外標(biāo)法由工作曲線求得
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