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三氯乙酸,又名三氯醋酸,是一種有機化合物,化學(xué)式為C2HCl3O2,有刺激性氣味,易潮解,溶于水、乙醇、乙醚 。主要用于有機合成和制備醫(yī)藥、也可用作化學(xué)試劑、殺蟲劑。
TCA與蛋白質(zhì)之間主要有以下幾個方面的作用:
1、在酸性條件下與蛋白質(zhì)形成不溶性鹽。
2、作為蛋白質(zhì)變性劑使蛋白質(zhì)構(gòu)象發(fā)生改變,暴露出較多的疏水性基團,使之聚集沉淀。
3、隨著蛋白質(zhì)分子量的增大,其結(jié)構(gòu)復(fù)雜性與致密性越大,TCA可能滲入分子內(nèi)部而使之較難被完全除去,在電泳前樣品加熱處理時可能使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生酸水解而形成碎片,而且隨時間的延長這一作用愈加明顯;在電泳時使用TCA對蛋白質(zhì)樣品的濃縮或除鹽時,對于分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì),要慎重選擇TCA。對小分子量蛋白質(zhì)的濃縮,采用TCA時也有兩點需要注意:一是用TCA沉淀后,盡量用丙酮徹底抽提TCA;二是樣品處理后要盡快進行電泳分析,以免發(fā)生聚集及斷裂,造成結(jié)果分析的不準(zhǔn)確。
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