新型冠狀病毒核衣殼蛋白（N 蛋白）人源 IgG 單克隆抗體溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

Human IgG Monoclonal Antibody to Nucleocapsid Protein Solution Reference Material of 2019 Novel Coronavirus (2019-nCoV)

    新型冠狀病毒核衣殼蛋白（N 蛋白）人源 IgG 單克隆抗體溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)，用于新型冠狀病毒 IgG 抗體免疫法檢測(cè)的量值溯源、測(cè)量方法驗(yàn)證評(píng)價(jià)以及實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制。

一、樣品制備

    本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是以新冠病毒重組核衣殼蛋白（N 蛋白）為免疫原篩選出高親和力 IgG 單克隆抗體，并進(jìn)行人源化改造，使之能模擬病人血清中 IgG 抗體與試劑盒中的包被抗原和二抗反應(yīng)，得到新型冠狀病毒核衣殼蛋白（N 蛋白）人源 IgG 單克隆抗體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)候選物原料，采用 0.1M 檸檬酸緩沖溶液(1M Tris 調(diào)至 pH6.7)按照比例稀釋后進(jìn)行分裝和定值。

二、溯源性及定值方法

    采用聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）、凝膠排阻液相進(jìn)行純度分析，采用酶聯(lián)免疫吸附方法（ELISA）進(jìn)行活性評(píng)價(jià)，基于氨基酸分析的同位素稀釋質(zhì)譜方法對(duì)緩沖溶液中新型冠狀病毒核衣殼蛋白（N 蛋白）人源 IgG 單克隆抗體的質(zhì)量濃度進(jìn)行測(cè)定，作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值。同位素稀釋質(zhì)譜法是國際公認(rèn)的潛在基準(zhǔn)測(cè)量方法，通過開展方法確認(rèn)，以 GBW09236 L-纈氨酸、GBW09237 L-亮氨酸、GBW09238 L-異亮氨酸和GBW09235 L-苯丙氨酸純度國家一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為量值溯源參考標(biāo)準(zhǔn)，并使用經(jīng)檢定/校準(zhǔn)的稱量等計(jì)量器具，確保本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量值溯源至 SI 基本單位千克（kg）和摩爾（mol）。

三、特性量值及不確定度

    所賦特性量值的不確定度由定值測(cè)量、均勻性和穩(wěn)定性引入的不確定度分量合成得到。本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)密度為 1.008 g/cm3（t = 21.8 °C），可據(jù)此進(jìn)行體積濃度的換算。

四、均勻性及穩(wěn)定性評(píng)估

    參照 JJF1343 國家計(jì)量技術(shù)規(guī)范（等效 ISO 指南 35），采用同位素稀釋質(zhì)譜方法對(duì)該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行均勻性研究，結(jié)果表明均勻性良好，最小取樣量為 20 μL。采用同位素稀釋質(zhì)譜和高效液相方法對(duì)該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行了初步穩(wěn)定性研究，參考同類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，有效期暫定至 2020 年 5 月 10 日，研制單位將繼續(xù)跟蹤監(jiān)測(cè)該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性，有效期內(nèi)如發(fā)現(xiàn)量值變化，將及時(shí)通知用戶。

五、包裝、貯存及使用

    1.包裝規(guī)格：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用 0.5 mL 帶蓋凍存管包裝，每管 100 μL。

    2.保存和運(yùn)輸條件：置于-70 ℃冰箱中保存。采用干冰運(yùn)輸，收到標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)后應(yīng)檢查標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是否處于冰凍狀態(tài)。檢查無誤才可用于實(shí)驗(yàn)。

    3.使用注意事項(xiàng)：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在 4°C 可穩(wěn)定 3 天、室溫環(huán)境下可穩(wěn)定 1 天，不建議反復(fù)凍融使用。對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，推薦使用 0.01M PBS（pH = 7.4）緩沖溶液作為稀釋劑。

聲明

1．本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)僅供實(shí)驗(yàn)室研究與分析測(cè)試工作使用。因用戶使用或儲(chǔ)存不當(dāng)所引起的投訴，不予承擔(dān)責(zé)任。

2．收到后請(qǐng)立即核對(duì)品種、數(shù)量和包裝，相關(guān)賠償只限于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)本身，不涉及其他任何損失。

3．僅對(duì)加蓋“中國計(jì)量科學(xué)研究院標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)專用章”的完整證書負(fù)責(zé)。請(qǐng)妥善保管此證書。

4．如需獲得更多與應(yīng)用有關(guān)的信息，請(qǐng)與技術(shù)咨詢部門聯(lián)系。

注：以上信息僅供參考，以產(chǎn)品附帶證書為準(zhǔn)。