先了解質粒的基本組成元素。 1）復制起始點Ori。該位點決定了質粒的宿主及質粒的拷貝數(shù)，它是質粒中一段特定序列，富含AT和重復序列。 圖譜上只有一個Ori，表示質粒是原核克隆表達質粒；有兩個Ori，則表示該質粒是，穿梭質粒，即可在原核也可在真核中復制。 2）抗性篩選基因。圖譜中Kan/tet就是抗生素抗性基因，方便后續(xù)通過抗生素篩選陽性克隆。特點就是單詞最后會以大寫R或上標r結束。 一般克隆載體只有一種抗性篩選標記，部分表達載體及穿梭質粒具有兩種抗性篩選標記。 3）多克隆位點（MCS），即一系列限制性內切酶酶切位點，是外源DNA插入位點，一般可通過酶切/連接方式將外源DNA插入質粒，外源DNA 一般小于10kb，而片段越長，轉化效率越低。 一般位于轉錄啟動和轉錄終止信號之間；所包含的限制性內切酶位點數(shù)量和組成因載體不同會有所差異，且其中的酶切位點在質粒中為單一的酶切位點；同時在使用時需注意質粒載體與外源DNA酶切位點的兼容性問題。 熒光標記或蛋白標簽序列。蛋白純化標簽蛋白：His-Tag, GST-Tag等；蛋白檢測標簽蛋 白：Myc-Tag， Flag-Tag， HA-Tag 等；熒光蛋白表達標簽：GFP, mCherry 等。